成果報告書詳細
管理番号20140000000441
タイトル平成25年度成果報告書 「がん超早期診断・治療機器の総合開発 超早期高精度診断システムの研究開発:血液中のがん分子・遺伝子診断を実現するための技術・システムの研究開発 血中分子・遺伝子診断のための基礎技術の研究開発(癌マーカー細胞群の濃縮・検出・培養技術の確立とその診断応用)」
公開日2015/3/24
報告書年度2013 - 2013
委託先名静岡県立静岡がんセンター 独立行政法人国立がん研究センター
プロジェクト番号P10003
部署名バイオテクノロジー・医療技術部
和文要約 本プロジェクトでは、血液検査によるがんの転移可能性、悪性度の診断をはじめとする質的診断を可能にすることで、患者に最適ながん治療の実現を目的としている。このため、一定量の末梢血に含まれるCTC(Circulating Tumor cell) を濃縮後に、使い捨てチップで検体間コンタミネーション・フリーでの測定が可能なフローサイトメーターにより、血液中CTCを計数し、且つ、CTCを回収または分離してCTCの細胞診断までを行う診断装置とそのプロトコルの開発を行なっている。

今年度の主な成果は以下の通りである。
・がんの転移、浸潤に関わる上皮間葉移行を獲得したCTCをとらえるため、Vimentinによる細胞検出系を確立し、臨床試験においてEpCAM(-)、Cytokeratin(-)のCTCの検出、分離に成功した。
・肺がん、乳がんの遺伝子変異が既知の症例において、変異の検出に成功した。また、CellSearchが検出感度以下であった症例においても、変異の検出に成功した(肺がん)。
・臨床試験において、次世代シークエンサを用いて、既知の遺伝子変異を含む変異の検出に成功した。
・CTCの高感度検出、高精度検出に必要な装置及びマイクロ流路チップの改良・最適化を実施した。
英文要約 The objective of the project is to achieve optimal cancer treatment in patients with the precise diagnosis of cancer such as early detection of metastasis and/or malignant grade by blood tests. The team is developing the protocol and its diagnostic equipment which are to detect and sort CTCs by disposable microfluidics chip based flowcytometer, after concentrate CTCs from peripheral blood.
The achievements of FY2013 are as follows,
・We have established immunocytochemical staining for vimentin to detect CTCs that underwent EMT and we were successful in detection and isolation of EpCAM-negative and cytokeratin-negative CTCs using clinical samples.
・Somatic mutations in cancer-related driver genes were successfully detected using CTCs isolated from patients with lung cancer and breast cancer. Of note, those mutations were detected in patients who were CTC-negative by CellSearch method.
・In clinical studies conducted this year, driver mutations were successfully detected using CTCs after whole genome amplification by next generation sequencing and this implies the potential of comprehensive mutational analysis using in cancer-related genes using CTCs.
・The equipment and micrfluidic chip has been improved and optimized for more sensitive and precise detection of CTCs.
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